Erst grün, dann rot - Timer-Farbstoff verrät das Alter von Proteinen
Bei vielen Krankheiten, von Infektionen bis zu Krebs, ist der Proteinaufbau und -abbau in der Zelle gestört. Wissenschaftler aus dem Deutschen Krebsforschungszentrum (DKFZ), dem Zentrum für Molekulare Biologie der Universität Heidelberg (ZMBH) und dem Europäischen Laboratorium für Molekularbiologie (EMBL) haben nun eine Methode entwickelt, mit der sie den Alterungsprozess von Proteinen in einer Zelle mit bislang nicht da gewesener Genauigkeit beobachten können.
Der neue Timer-Farbstoff macht sichtbar, dass die Mutterzelle die älteren Proteine (rot) behält, die Tochterzelle dagegen neue Moleküle (grün) bildet.
© dkfz.de
Proteine sind wichtige Werkzeuge unseres Körpers: Sie verleihen ihm Struktur, beschleunigen chemische Reaktionen, transportieren wichtige Stoffe, schützen vor Krankheitserregern oder dienen im Notfall als Energielieferant. Wenn sich aber die Menge eines Proteins stark erhöht oder reduziert, sind häufig Krankheiten die Folge. Wird beispielsweise das Proteins p53, auch „Wächter des Genoms“ genannt, unkontrolliert abgebaut, kann in der betroffenen Zelle weder ein Schaden an der DNA repariert, noch die Zellteilung reguliert oder der Zelltod eingeleitet werden. Dadurch beginnt sich die fehlerhafte Zelle unkontrolliert zu teilen, ein Tumor entsteht. Um beurteilen zu können, ob der Proteinstoffwechsel einer Zelle gestört ist, haben Forscher um Prof. Michael Knop eine neue Methode entwickelt: Sie bringen die Proteine zum Leuchten. Aber nicht – wie bisher üblich – mithilfe nur eines Fluoreszenzfarbstoffs, sondern mit einem Komplex aus einem rot und einem grün fluoreszierenden Marker. Dieser sogenannte Tandem-Fluoreszenzprotein-Timer (tFT) wird schon während der Proteinentstehung an das Protein gekoppelt und gibt den Forschern so Aufschluss über Menge, Aufenthaltsort und Alter der Moleküle.
Michael Knop, Leiter der Arbeitsgruppe Zellmorphogenese und Signalübermittlung in der DKFZ-ZMBH-Allianz, erklärt, wie das neue Verfahren funktioniert: „Unmittelbar nachdem die Zelle das Protein gebildet hat, beginnt der grüne Farbstoff – bestehend aus dem grün fluoreszierenden Protein GFP – zu leuchten. Überall dort, wo es in der Zelle grün leuchtet, ist das Molekül also zu finden. Anhand der Farbintensität ist es zudem möglich, die Proteinmenge zu bestimmen.“ Aber auch auf das Alter der Moleküle können die Wissenschaftler nun schließen. „Mit fortschreitender Zeit fängt auch das rot fluoreszierende Protein zu leuchten an. Dadurch verfärben sich die Proteine von grün nach rot, je älter sie werden“, erläutert Knop weiter. „Damit sind neu gebildete – grüne – von alten – roten – Proteinen unterscheidbar. So können wir deren Lebensdauer berechnen und überprüfen, ob ein Protein schneller oder langsamer als gewöhnlich abgebaut wird.“ Ein weiterer Pluspunkt: Die tFTs fluoreszieren sehr hell, dadurch ist der Nachweis sehr empfindlich.
Mithilfe der neuen tFTs ist es möglich, das Alter von Proteinen in einem Zeitrahmen von zehn Minuten bis zu mehreren Stunden zu bestimmen. Wird der grüne Farbstoff GFP mit verschiedenen Fluoreszenzfarbstoffen kombiniert, können sogar über mehrere Tage andauernde Abbauprozesse verfolgt werden. Als Modellorganismus wählten die Wissenschaftler die Hefe. Der Grund: Der Einzeller ist unseren Zellen in vielen grundlegenden Prozessen sehr ähnlich und daher als Model gut geeignet. Prof. Elmar Schiebel, Leiter der Arbeitsgruppe Chromosomen Segregation in der Zellteilung in der DKFZ-ZMBH-Allianz, hat mit seinen Mitarbeitern zudem gezeigt, dass dieses Verfahren auch in menschlichen Zellen funktioniert. Dadurch eröffnen sich ganz neue Perspektiven für die Untersuchung geschädigter Zellen und für die Entwicklung neuer Medikamente, um die Proteinstabilität in kranken Zellen zu regulieren.
Originalveröffentlichung
Weitere News aus dem Ressort Wissenschaft
Diese Produkte könnten Sie interessieren
Kjel- / Dist Line von Büchi
Kjel- und Dist Line - Wasserdampfdestillation und Kjeldahl-Anwendungen
Maximale Genauigkeit und Leistung für Wasserdampfdestillation und Kjeldahl-Anwendungen
AZURA Purifier + LH 2.1 von KNAUER
Präparative Flüssigkeitschromatografie - Neue Plattform für mehr Durchsatz
Damit sparen Sie Zeit und verbessern die Reproduzierbarkeit beim Aufreinigen
Holen Sie sich die Analytik- und Labortechnik-Branche in Ihren Posteingang
Ab sofort nichts mehr verpassen: Unser Newsletter für Analytik und Labortechnik bringt Sie jeden Dienstag auf den neuesten Stand. Aktuelle Branchen-News, Produkt-Highlights und Innovationen - kompakt und verständlich in Ihrem Posteingang. Von uns recherchiert, damit Sie es nicht tun müssen.
